Western Blot Protocol / Western Blotting Protocol / Western Blot 프로토콜/ 웨스턴블롯 프로토콜

Western blot protocol은 크게 Sample preparation, Gel running, Transfer, Blocking, Antibody incubation, Detection이렇게 6가지로 구성되어 있다. 각각 step별로 실험방법과 주의사항을 알아보겠다. 1. Sample Preparation Culture dish에서 Cell harvest하여 EP tube로 옮긴 후 PBS를 이용하여 washing 하여 cell pellet을 얻는다. Cell Continue reading Western Blot Protocol / Western Blotting Protocol / Western Blot 프로토콜/ 웨스턴블롯 프로토콜

Immunoprecipitation (IP) 프로토콜 / IP 프로토콜 / Imunopreciptiation protocol / IP protocol

​IP assay는 단백질을 다루는 실험이므로 모든 step에서 온도를 낮게 유지하는 것이 좋다. 왜냐하면 단백질은 고온에서 3차 구조가 변성되기 때문에 단백질의 결합에 영향을 줄 수 있기 때문이다. Immunoprecipitation protocol Preparing the lysates Pre-clearing the lysates (optional) Immunoprecipitation Binding A/G agarose bead Continue reading Immunoprecipitation (IP) 프로토콜 / IP 프로토콜 / Imunopreciptiation protocol / IP protocol