ChIP assay 원리 / Chromatin immunoprecipitation (ChIP) assay 원리 / ChIP assay 목적
ChIP assay는 단백질과 DNA와의 결합 유무를 확인 할 수 있는 실험 방법이다. 1. ChIP assay 목적 및 개요 ChIP assay의 목적은 단백질이 DNA와 결합하는지 확인하는 것이다. 단백질과 그 단백질이 결합한...
Biology Experiments
ChIP assay는 단백질과 DNA와의 결합 유무를 확인 할 수 있는 실험 방법이다. 1. ChIP assay 목적 및 개요 ChIP assay의 목적은 단백질이 DNA와 결합하는지 확인하는 것이다. 단백질과 그 단백질이 결합한...
1. Genome editing의 기본 원리 유전자 편집의 (Genome editing) 기본 원리는 거의 동일하다.특정 부위를 인지하는 domain과 DNA를 절단하는 domain 크게 두 가지로 나뉘어져 있으며, 이것을 어떠한 것으로 사용 하는 가에...
유전자의 발현은 DNA -> mRNA -> protein으로 이루어지며 유전자가 기능을 수행하기 위한 일련의 과정을 "유전자의 발현"이라고 정의한다. 유전자 발현 (gene expression) 의 정의 Central dogma 유전자의 발현 (gene expression) 은...
최근 옌리멍 박사의 논문이 화제가 되고 있다. 하지만 아직 논문으로 부르기는 좀 민망한 부분이 있다. 논문을 게재하기 위해서는 동료 과학자들의 review가 반드시 필요하다. 일반적인 학술지에 투고하게 되면 다음과 같은 프로세스를...
Pull down assay 프로토콜은 크게 두 가지 방법으로 나뉘나 순서에만 약간 차이가 있을 뿐 크게 다르지 않다. 정제된 단백질과 bead를 먼저 붙이는 방법정제된 단백질과 다른 단백질과 반응시켜 단백질 복합체를 먼저...
신비한 실험 사전 논문 이해/해석 이거 하나면 끝납니다. 안녕하세요. Bio-Chae입니다. 생명과학에 대한 지식과 정보를 지속적으로 업데이트하기 위해서 노력중입니다. 오늘은 제가 쓴 e-book 하나를 소개해 드리려고 포스팅하게 되었습니다. 크몽이라는 사이트를 통해서...
GST-Pull down assay의 목적은 단백질간의 상호작용 (interaction)을 확인하는 것이다. Pull down assay는 실험의 이름 그대로 "Pull down" "끌어당겨서" 단백질의 interaction을 확인하는 것이다. IP와 굉장히 유사한 부분이 있다. 하지만 기본 원리에...
GST pull-down을 수행할 때 cell lysate와 GST가 tagging 된 protein을 섞어 주고 반응 이 잘 일어날 수 있는 환경을 조성하는 buffer를 넣어준 뒤 단백질들의 결합이 일어날 수 있도록 incubation 시켜준다....
Western blot protocol은 크게 Sample preparation, Gel running, Transfer, Blocking, Antibody incubation, Detection이렇게 6가지로 구성되어 있다. 각각 step별로 실험방법과 주의사항을 알아보겠다. 1. Sample Preparation Culture dish에서 Cell harvest하여 EP tube로...
Western blot buffer에 대해서 알아보도록 하겠다. 필요한 buffer들의 종류에는 lysis buffer, sample loading buffer, running buffer, transfer buffer, blocking buffer, washing buffer 등이 있다. 1. Lysis buffer - RIPA buffer...
Western blot은 특정 단백질을 검출하기 위해서 사용하는 실험 방법이다. Sample preparing and loadingSDS-PAGETransfer to membranePrimary antibody and washingSecondary antibody and washingDetection 1. Western blotting 원리 Western blot은 세포나 조직에서 얻은...
어떤 buffer가 가장 적합한지 정하는 것에는 정답은 없다. 각 protein의 특성이 다르기 때문에 그 특성에 맞게 사용을 하는 것이 가장 좋다. Detergent의 경우로 예를 들자면 너무 강한 detergent가 포함되어 있는...