Biology Experiments
Stripping 의 목적은 이미 결합된 항체를 제거하고 다른 항체를 결합시킨 결과를 얻기 위함이다. 1. Stripping 이란? Western blot stripping은 membrane에 붙였던 항체를 제거하고 다른 항체를 붙이는 것을 뜻한다. 영어 단어 strip (옷을 벗기다) 의 뜻처럼 이미 결합되어 있는 항체를 벗겨내고 Continue reading Stripping buffer 원리 / western blot stripping buffer 원리
RIPA lysis buffer는 빠르고 효과적을 세포를 lysis할 수 있고 단백질들을 안정화 하는 능력이 뛰어난 buffer이다. 그래서 mammalian cell을 lysis하는데 주로 사용되는 buffer이다. 이 buffer는 비특이적인 단백질의 결합을 최소화 하여 background가 적다는 장점이 있지만 SDC, SDS와 같은 detergent들이 포함되어 있으므로 단백질의 Continue reading RIPA lysis buffer의 역할 및 조성
GST pull-down을 수행할 때 cell lysate와 GST가 tagging 된 protein을 섞어 주고 반응 이 잘 일어날 수 있는 환경을 조성하는 buffer를 넣어준 뒤 단백질들의 결합이 일어날 수 있도록 incubation 시켜준다. 이때 사용하는 buffer는 여러 종류가 있겠지만 가장 기본적인 buffer의 조성을 Continue reading GST pull-down assay buffer / GST pull-down assay 버퍼 / GST pull-down assay binding buffer / GST pull-down 버퍼
Western blot buffer에 대해서 알아보도록 하겠다. 필요한 buffer들의 종류에는 lysis buffer, sample loading buffer, running buffer, transfer buffer, blocking buffer, washing buffer 등이 있다. 1. Lysis buffer – RIPA buffer (radioimmunoprecipitation assay buffer) RIPA buffer는 ionic detergent인 sodium deoxycholate (SDC)가 Continue reading Western blot buffer 역할/ western blotting buffer 역할/ 웨스턴블롯 buffer 역할 / 웨스턴블롯 버퍼 역할
어떤 buffer가 가장 적합한지 정하는 것에는 정답은 없다. 각 protein의 특성이 다르기 때문에 그 특성에 맞게 사용을 하는 것이 가장 좋다. Detergent의 경우로 예를 들자면 너무 강한 detergent가 포함되어 있는 경우에는 target의 protein-protein interaction 마저 깰 수 있지만 너무 약한 Continue reading Immunoprecipitation (IP) buffer / 면역침강법 buffer / EDTA 역할 / EGTA 역할